Антиядерные антитела

Антиядерные антитела – как интерпретировать результат?

Нормальные титры антиядерных антител должны быть ниже 1:40. Если результат скрининг-теста нотрицательный и отсутствуют клинические симптомы, указывающие на заболевание соединительной ткани, диагноз не распространяется на конкретные антитела, например, анти-дцДНК, анти-Sm.

Клинически значимыми титрами у взрослых считаются ≥ 1: 160, а у детей ≥ 1:40.

В случае положительных результатов предлагается интерпретировать результат анализа следующим образом:

Титр 1: 40-1: 80 – пограничный (слегка положительный). При отсутствии клинических симптомов заболеваний соединительной ткани повторять тест или проводить контрольный тест не рекомендуется, так как результаты у большинства людей не меняются с годами.
Титр 1: 160-1: 640 – средне положительный. При отсутствии клинических симптомов заболеваний соединительной ткани рекомендуется повторить анализ через 6 месяцев.
Титр ≥ 1: 1280 – высоко положительный. При наличии клинических симптомов заболеваний соединительной ткани для диагностики заболевания требуется дополнительная специализированная диагностика.

Следует иметь в виду, что серологические тесты на антиядерные антитела являются частью сложного диагностического процесса, и положительный результат всегда следует интерпретировать в контексте клинической картины и появления характерных симптомов заболевания.

Антиядерные антитела с низким титром встречаются у 5% людей из здоровой популяции, и их частота увеличивается с возрастом. В 65 лет — до 37 %. Положительный ответ без симптомов необходимо подтверждать, учитывая дополнительные анамнестические, клинические и лабораторные результаты.

Кроме того, их присутствие обнаруживается при физиологических и патофизиологических состояниях, но в этих случаях антиядерные антитела не имеют диагностического значения.

В эту группу входят:

инфекции, например, туберкулез, сифилис, малярия;
заболевания печени, например, цирроз печени;
заболевания легких, например саркоидоз, асбестоз;
раковые заболевания, например лейкоз, лимфома, рак молочной железы, меланома;
кожные заболевания, например псориаз, красный плоский лишай;
состояния после трансплантации органов, например, после пересадка сердца, пересадки почки;
использование лекарственных средств, например противоэпилептических препаратов, гидралазина, солей лития;
другие аутоиммунные заболевания, например. тиреоидит Хашимото, болезнь Аддисона, диабет типа I;
беременность (до 20% беременных).

Появление различных типов антиядерных антител характеризуется этнической изменчивостью. Например, у людей с кавказским системным склерозом анти-АСА антитела встречаются чаще, а у афроамериканцев и жителей Африки чаще выявляются реактивные антитела к топоизомеразе.

Стоимость

Сдать анализ АНФ можно в независимой лаборатории, частной клинике или государственном медицинском учреждении

Важно знать о том, что не во всех бюджетных поликлиниках подобная услуга предоставляется. Относительно ее наличия необходимо уточнять в регистратуре

Исследование является платным даже в государственных медицинских учреждениях. Стоимость анализа напрямую зависит от ценовой политики клиники, складывающейся из множества факторов. Минимальная цена составляет 1000 рублей, максимальная не превышает 1700 рублей. Кроме того, необходимо дополнительно оплатить забор крови. Стоимость данной услуги, как правило, не превышает 200 рублей.

Как проводится анализ на антиядерные антитела

Для выявления антиядерных антител берется кровь из вены на локтевом сгибе.

Методы, используемые для определения антител, очень разные и зависят от типа измеряемого антиядерного антитела.

Это в первую очередь иммунологические методы, такие как:

ELISA;
РИА;
непрямая иммунофлюоресценция;
метод двойной иммунодиффузии;
вестерн-блот.

Для выявления антиядерных антител используется двухэтапная диагностика. Сначала проводится скрининг-тест с использованием метода непрямой иммунофлюоресценции, характеризующегося высокой чувствительностью.

Методика заключается в иммобилизации на микроскопном предметном стекле клеток линии HEp-2, полученных из эпителиальных клеток человека. Клетки этой линии имеют в своей цитоплазме и в ядре антигены, связывающие патологические антитела из крови пациента.

После добавления сыворотки пациента на предметное стекло антиядерные антитела связываются со специфическими антигенами и видны под микроскопом благодаря специальным флуоресцентным маркерам.

Преимущество непрямой иммунофлуоресценции заключается в способности дифференцировать типы антител на основе типа флуоресцентного красителя. Например, светящееся гомогенное клеточное ядро означает наличие антител против dsDNA или антител против ssDNA.

Положительный результат скрининг-теста должен быть подтвержден. Для этой цели используются очень специфические иммунологические методы, например вестерн-блот. После обнаружения присутствия и идентификации типа антиядерного антитела определяют его титр, то есть концентрацию сыворотки, при которой можно определить присутствие антител.

Описание

Анализ АНА — это самый информативный метод постановки диагноза при подозрении на любые аутоиммунные расстройства, в основном, это заболевания соединительной ткани. Но встречаются также наличие антител при злокачественных процессах, инфекционных и т.д.

Самая большая чувствительность антител к таким недугам:

Системной красной волчанки.
Ревматоидному артриту.
Болезни Шегрена.

Эти клетки могут быть обнаружены также примерно у трети пациентов, страдающих хронической формой гепатита.

Вместе с выявлением АНА при выполнении исследования важно оценить уровень содержания таких иммуноглобулинов, как IgA, IgM, IgG. Выявление данных составляющих в крови у пациентов может указывать на большие шансы появления ревматических патологий и коллагенозов

Если же взаимосвязь между содержанием антител и симптомами не была выявлена, само наличие АНА в крови указывает на выбор правильной тактики лечения. Длительное сохранение высоких титров говорит о неутешительном положении дел. Понижение этих титров говорит о ремиссии патологии, гораздо реже о скорой смерти.

Вместе с тем данные антитела могут быть выявлены у определенного процента здоровых лиц и титры АНФ могут выходить за пределы нормы.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ:

Референсные значения (вариант нормы):

Пример результата

Параметр	Результат	Референсные значения
Антинуклеарный фактор на клеточной линии HEp-2, полуколичественное определение (непрямая иммунофлуоресценция)	обнаружено	не обнаружено
Титр антител	1:80	<1:40
Тип свечения	Гомогенный

Заключение:

развернутое заключение к результату исследования будет сформировано в соответствии с выявленным типом свечения АНФ.

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации. » => string(4) «1235» => NULL => string(2) «24» => string(1) «1» => NULL => array(1) { => array(3) { => string(1) «N» => string(2) «12» => string(31) «Кровь (сыворотка)» } } }

Показания

Исследовать антинуклеарный фактор целесообразно в следующих случаях:

Диагностика аутоиммунных и некоторых других системных заболеваний без ярко выраженной симптоматики;
Комплексная диагностика системной красной волчанки, ее формы и стадии, а также выбор тактики лечения и составление прогноза;
Диагностика лекарственной волчанки;
Профилактическое обследование пациентов с диагнозом красная волчанка;
Наличие специфических симптомов: продолжительная лихорадка без установленной причины, боли и ломота в суставах, мышцах, кожные высыпания, повышенная утомляемость и т.д.;
Наличие симптомов системных заболеваний: поражение кожи или внутренних органов (почки, сердце), артрит, эпилептические припадки и судороги, лихорадка, беспричинное повышение температуры и т.д.;
Назначение лекарственной терапии дизопирамидом, гидралазином, пропафеноном, прокаинамидом, ингибиторами АПФ, бета-блокаторами, пропилтиоурацилом, хлорпромазином, литием, карбамазепином, фенитоином, изониазидом, миноциклином, гидрохлортиазидом, статинами, поскольку есть риск развития лекарственной красной волчанки.

Подготовка к анализу и методика проведения исследования

Определение антител может быть выполнено в нескольких вариантах

Анализ сдается утром натощак либо в другое время, однако не ранее 5-6 часов после последнего приема пищи. Также желательно не принимать никакие лекарственные средства до взятия крови на исследование.

Существует несколько вариантов проведения анализа, отличающихся по своей точности и возможности количественной оценки концентрации антител.

Скрининговое ИФА-исследование (иммуноферментный анализ) позволяет выявить наличие суммарных антинуклеарных антител и их титра. К плюсам метода относится его относительная дешевизна и возможность выяснить, необходимы ли расширенные исследования. При отрицательном результате анализа дальнейшие исследования чаще не показаны.

Непрямая флуоресцентная микроскопия — это метод, основанный на окрашивании антител специальными веществами, дающими под ультрафиолетовым светом зеленое свечение. Тип и характер свечения позволяет врачу лабораторной диагностики определить, с какими компонентами клетки связались антитела, а также примерно узнать их количество.

Иммуноблот-исследование позволяет определить наличие каждого типа антинуклеарных антител по отдельности. Чаще всего этот анализ назначается после положительного результата другого исследования для уточнения диагноза.

Показания к исследованию

Врач может направить больного на этот анализ при обнаружении следующих изменений состояния его организма:

длительно сохраняющаяся субфебрильная температура тела (до 37,5 °С), лихорадка неясного генеза;
похудение на 5 кг и более за 3-6 месяцев без видимой на то причины (образ жизни больного за этот период не стал активнее, чем был, пищевые привычки не изменились);
увеличение лимфатических узлов неясного генеза;
боли в суставах, артриты неясной этиологии;
боли в мышцах, выраженная общая слабость;
сыпь на коже по типу васкулита;
патологические изменения со стороны одновременно многих органов и систем;
высокая СОЭ без видимых на то причин;
анемия, снижение уровня лейкоцитов и тромбоцитов в периферической крови;
повышенная концентрация гамма-глобулинов в крови;
белок в моче (при необходимости уточнить характер поражения почек, причину протеинурии).

Антинуклеарные антитела: что это?

Антинуклеарные антитела — антитела к разным компонентам клеточного ядра собственного организма. Антинуклеарные, антиядерные антитела (сокращенно – ANA) – это группа аутоантител к разным компонентам клеточного ядра (ДНК, РНК и многим другим), которые обнаруживаются почти у всех лиц, страдающих системными заболеваниями соединительной ткани. Анализ крови на антинуклеарные антитела позволяет не только диагностировать эти заболевания, но и провести дифференциальную диагностику между ними, поскольку титры (концентрация) этих антител в крови при разных болезнях различна, кроме того, при каждой из них выявляются лишь определенные разновидности ANA.

Итак, к определенным структурам клеточных ядер организм вырабатывает антитела – аутоантитела. Образуются комплексы антиген-антитело, которые откладываются на базальных мембранах органов, тканей (на клетках кожи, синовиальных и серозных оболочек, почек, головного мозга и прочих) и сосудов, несущих кровь к этим структурам. Развиваются аутоиммунные процессы, результатом которых становится нарушение структуры тканей и воспалительный процесс в них.

Так, антинуклеарные антитела обнаруживаются в крови лиц, страдающих следующими заболеваниями:

системная красная волчанка (в 98-100 % случаев);
системная склеродермия;
смешанное заболевание соединительной ткани;
синдром Шегрена;
болезнь Рейно;
ревматоидный артрит;
дерматомиозит;
полимиозит;
ювенильный ревматоидный артрит;
узелковый полиартериит.

Некоторые виды антиядерных антител обнаруживаются в крови лиц, страдающих онкологическими, инфекционными или неиммунными воспалительными заболеваниями:

туберкулез легких и внелегочный;
хронический гепатит, активная фаза;
инфекционный эндокардит;
инфекционный мононуклеоз;
ВИЧ-инфекция;
малярия;
инсулинзависимый сахарный диабет;
легочный фиброз;
цирроз печени;
хроническая почечная недостаточность;
лимфогранулематоз;
лейкоз;
гемолитическая анемия и другие.

Стоит отметить, что при заболеваниях неиммунной природы титры антинуклеарных аутоантител нестойки. Чтобы отличить временное повышение их титра от стойкого присутствия в сомнительных случаях, пациенту рекомендуют повторить этот анализ через 1, 2 недели или через месяц. Кроме того, проводить обследование следует в одной и той же лаборатории, поскольку в разных лабораториях могут быть использованы разные методы определения ANA, а также наборы разных антигенов – это существенно исказит результаты, снизит их информативность.

Методы

Существует два метода определения антинуклеарных антител в крови.

Непрямая иммунофлуоресцентная микроскопия

Непрямая иммунофлуоресцентная микроскопия (FANA — fluorescent antinuclear antibody test) на препарате Hep-2 клеток (клеточная линия, полученная из аденокарциномы гортани) — антинуклеарные антитела (при их наличии) связываются с антигенами клеток Hep-2, добавляют специальные светящиеся метки, присоединяющиеся к образованному комплексу и под микроскопом смотрят интенсивность и тип свечения. Лучший метод исследования антинуклеарных антител. Другое название — волчаночные тест-полоски.

Результат исследования пишут в виде титра — максимального разведения крови, при котором видно свечение, также описывается тип флуоресценции (в случае положительного результата). Чем больше антител, тем выше титр. Низкие титры считаются негативными, а высокие обозначают повышенную концентрацию антиядерных антител.

Пример положительного результата исследования антиядерных антител: «Положительный разведение/титр 1:320, гомогенная картина“.

Алгоритм действий врача после исследования антиядерных антител методом FANA

отрицательный результат анализа на антиядерные антитела + симптомы — провести анализы: anti-Ro и anti-Jo1
положительный результат анализа на антиядерные антитела + наличие/отсутствие симптомов — провести анализы на anti-DNA, anti-Sm, anti-Ro, антигистоновые и антицентромерные антитела, волчаночный антикоагулянт, anti-Sci-70, anti-U1 RNP, anti-Jo1 — зависит от проявлений заболевания

Ферментный иммунный анализ

Ферментный иммунный анализ (ELISA) — антитела, присутствующие в крови, связываются с соответствующим антигеном, что приводит к изменению цвета раствора.

менее 1.0 U — отрицательный результат (норма)
1.1-2,9 U — слабо положительный (требует повторения)
3,0-5,9 U — положительный
более 6,0 — резко положительный

Положительный результат анализа на антинуклеарные антитела — это не диагноз, а восклицательный знак о необходимости дополнительных исследований. Требует периодического, более тщательного обследования, для максимально раннего выявления возможного заболевания.

Отрицательный результат исследования на антинуклеарные антитела указывает на их отсутствие в крови, но не исключает диагноз аутоиммунного заболевания.

Антинуклеарные антитела — это

большой комплекс антител (более 200), преимущественно иммуноглобулины G (реже IgМ и IgА), которые появляются в результате нарушении механизма аутотолернатности при аутоиммунных и ревматических заболеваних.

ANA может быть положительным еще до появления первых симптомов. Около 95 % пациентов с системной красной волчанкой имеют антиядерные антитела. Наличие симптомов волчанки подтверждает диагноз.

Механизм образования антиядерных антител

влияние ультрафиолетовых лучей на кожу в результате происходит активация процессов запрограммированной гибели клетки (апоптоза), что является нормальной реакцией организма, но при системных заболеваниях происходит еще и усиленная миграция лимфоцитов
компоненты клетки, которые были ранее недоступны и невидимы для иммунной системы, такие как ядрышки, гистоны, оболочка ядра и др. «оголяются», а макрофаги, вместо того, чтоб данный материал просто «утилизировать», передают сигнал о нем по цепочке иммунного ответа
В-лимфоциты, в ответ на сигнал макрофага, начинают вырабатывать антиядерные антитела, которые связываясь с соответствующим ангигеном образуют иммунные комплексы (ядерный антиген + антитело IgG, IgM, IgA)
иммунные комплексы откладываются на базальной мембране различных органов и тканей, особенно сосудов, активация системы комплемента — местного воспалительного ответа
повреждение с нарушением функции органа

Антинуклеарные антитела направлены против различных структур нормальной клетки.

anti-Ro (SS-A) — антитела к белкам связанным с РНК Y1-Y5 в сплайсосомах
anti-Jo1 — антитела к цитоплазматическому антигену Jo-1
anti-dsDNA — антитела к двухцепочечной ДНК
anti-Sm
anti-La (SS-B) — антитела к белку, связанному с РНК-полимеразой-3
anti-Sci 70 — антитела к ядерной топоизомеразе
anti-U1 RNP — антитела к U1 рибонуклеопротеину
антицентромерные антитела
антигистоновые антитела